高压制备纽莫康定B0的中试研究（三） 制备中试上样量为11.4g粗品

3结果分析

3.1制备所得纽莫康定B₀冻干粉质量分析

在优化后的高压150mm制备条件(采用正相硅胶，V(二氯甲烷(工业))∶V(甲醇)∶V(水)=42∶9∶1，制备中试上样量为11.4g粗品，纽莫洗脱流量为480mL/min，康定检测波长分别为276，研究210nm)下，高压上样量共980g，制备中试得到4批次纽莫康定B₀冻干粉质量共343.7g，纽莫其质量情况如表5所示。康定

由表5知：各批次冻干粉B₀质量分数均大于95%(以冻干粉1为例，研究其HPLC检测如图2所示，高压纽莫康定B₀的制备中试色谱纯度为98.58%，纽莫康定C₀的纽莫色谱纯度为0.04%)，可用于下游合成。康定另外，研究各冻干粉C₀杂质均降低至0.05%以下。周永正等以表面修饰了极性基团的硅胶亲水材料进行层析，可以将关键杂质C₀降至小于0.1%。相比，笔者开发的方法更能够对纽莫康定B₀的异构体C₀进行有效去除，纽莫康定B₀是合成醋酸卡泊芬净的起始原料，因此在产品质量上，为下游合成提供了有效保证。

3.2制备液稳定性分析

王欣荣等发现分离过程中纽莫康定稳定性差的问题。在前期小试研究中，亦发现纽莫康定B₀制备液常温放置不稳定，会有RRT1.36杂质峰出现。实验以纽莫康定B₀制备收集液为研究对象，在4℃冷库(避光)的保存条件下对稳定性进行了简单摸索。液相检测数据如表6所示。由表6可知：4℃避光条件下，B₀制备液放置7d时，B0的HPLC色谱纯度降低了0.69%，RRT0.96峰和RRT1.14峰的HPLC色谱纯度基本不变；RRT1.36峰在放置9d时检测出来；13d时，RRT0.96峰的HPLC色谱纯度降低很小，纽莫康定B₀的HPLC色谱纯度减小了0.71%，RRT1.14峰的HPLC色谱纯度增加了0.34%，RRT1.36峰的HPLC色谱纯度增加至0.27%。因此，纽莫康定B0制备液在4℃避光的条件下7d内相对稳定。在中试生产中，纽莫康定B₀制备液需及时放入4℃冷库中保存，需要7d内处理完毕。在实际中试研究中，有4℃避光冷库作为辅助可以保证储藏条件，制备液放置时间为影响其稳定性的主要因素，因此实验中没有考察光照、温度对制备液稳定性的影响。

3.3总收率分析

高压制备纽莫康定B₀的中试研究分4个亚批进行，总消耗纽莫康定B₀的粗品质量980g。为了对放大规模的商业化生产提供数据支持和借鉴，需要对总收率进行计算，实验总收率计算式为

式中：E为冻干粉i的质量；F为冻干粉的B₀质量分数。

经过计算，总收率为41.32%。影响总收率的因素主要有：填料、制备方法和卡泊芬净合成对纽莫康定B₀的粗品质量需求等。为了提高总收率，可以和生产填料的厂商寻求合作，开发新型改良正相硅胶，进而继续优化适合其使用的色谱制备方法，优化卡泊芬净合成后的提纯工艺。亦或，统筹从发酵液至卡泊芬净整体的提取工艺，达到一个合理的平衡点，以降低其对纽莫康定B₀的粗品质量要求，进而可以提高纽莫康定B0高压制备的收率。

另外，为了提高生产的总收率和降低成本，也可以将高压制备过程中产生的HPLC色谱纯度低于95%的B₀制备液进行回收利用。具体方法：将低浓度制备液经过收集、浓缩和干燥后，得到回收冻干粉(HPLC检测如图3所示，纽莫康定B₀的色谱纯度为84.30%，纽莫康定C₀的色谱纯度为0.65%)，再次进行制备回收套用。

4结论

以二氯甲烷、甲醇和水体系制备纽莫康定B₀，国内外未见具体报道。笔者以单因素实验的方法确定了150mm高压制备纽莫康定B₀的条件：采用正相硅胶，V(二氯甲烷(工业))∶V(甲醇)∶V(水)=42∶9∶1，上样量为11.4g粗品，洗脱流量为480mL/min，检测波长分别为276，210nm。相比氯仿、甲醇和水体系，该制备工艺毒性小，更绿色环保。以优化后条件，可以得到质量分数95%以上的B₀干粉，能有效将B₀异构体C₀降至0.05%以下，为下游合成卡泊芬净提供了更好的保证。通过对纽莫康定B₀制备液稳定性研究，制备液需及时放入4℃冷库中保存，需要7d内处理完毕，为进一步放大生产提供了数据支持。制备工艺生产周期短、成本低，且纯度高。

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